Estudio comparativo de la expresión y actividad del inflamasoma NLRP3 en fibroblastos y miofibroblastos cardíacos

Abstract

El inflamasoma NLRP3 es un complejo multiproteico que tiene como objetivo producir la fragmentación de la citoquina pro-inflamatoria, proIL-1, a su forma activa IL-1, facilitar su secreción al espacio extracelular y, de esta forma, regular y activar el sistema inmune innato. Este complejo está conformado por el receptor NLRP3, la proteína adaptadora ASC y la enzima llamada procaspasa-1. El inflamasoma puede ser encontrado en diversos tipos celulares, incluyendo los fibroblastos cardíacos (FC). Estas células, participan activamente en la homeostasis de la matriz extracelular (MEC) y responden a frente a estímulos patofisiológicos. Entre ellos, a TGF-1, el cual promueve la diferenciación de los FC a su forma más activa, los miofibroblastos cardiacos (MFC). Con la finalidad de conocer las principales diferencias del inflamasoma NLRP3 entre FC y MFC, empleamos diversas metodologías experimentales de carácter analítica. Los resultados obtenidos no mostraron diferencias en los niveles proteicos de ASC, NLRP3 y en la secreción de IL-1, tanto en FC como en MFC. Sin embargo, tanto los niveles proteicos de procaspasa-1, así como también la actividad de caspasa-1, fueron mayores en MFC respecto de FC. Por otra parte, se observaron mayores niveles proteicos de proIL-1 en FC, en comparación con los MFC. Finalmente, en base a los resultados obtenidos, se puede concluir que los MFC, presentan mayores niveles de expresión y actividad del inflamasoma NLRP3 que los FC

The NLRP3 inflammasome is a multiprotein complex that aims to produce fragmentation of the pro-inflammatory, pro-IL-1, cytokine to its active IL-1, facilitating its secretion to the extracellular space and, thus, regulating and activating the innate immune system. The complex consists of: NLRP3 receptor, ASC adapter protein and an enzyme called pro-caspase-1. The inflammasome can be found in various cell types, including cardiac fibroblast (FC). These cells are actively involved in the homeostasis of extracellular matrix (ECM) and responds against pathophysiological stimuli, including TGF-1, which promotes the differentiation of FC to its active form, cardiac myofibroblast (MFC). In order to know the NLRP3 inflammasome main differences between FC and MFC, we use various experimental methods of analytical character. The results showed no difference in protein levels of ASC, NLRP3 and secretion of IL - 1, either FC or MFC. However both, protein levels of pro-caspase-1 as well as the activity of caspase-1, were higher in MFC regarding FC. Moreover, higher protein levels of pro- IL- 1 in FC were observed compared to the MFC. Finally, based on the results obtained, it can be concluded that the MFC, have higher levels of expression and activity of the inflammasome NLRP3 than FC