La activación de TLR4 aumenta la expresión de e-selectina y promueve la adhesión del monocito sobre el fibroblasto cardíaco

Abstract

Los fibroblastos cardíacos (FC), han sido denominados células centinelas del corazón, pues responden de manera variada y compleja ante cualquier elemento externo o interno a fin de mantener la homeostasis. Esta respuesta se lleva a cabo mediante una maquinaria conformada por una amplia red de receptores, entre ellos los receptores tipotoll y, en particular, el TLR4. La activación de este receptor ha mostrado mediar respuestas inflamatorias y fibróticas tanto en FC, como en otras células; en donde la expresión de proteínas de adhesión y reclutamiento de células del sistema inmune componen un eje vital en estos procesos. Por tanto se buscó determinar si la activación de TLR4 en el FC de ratas adultas genera una mayor adhesión de monocitos a través de un aumento en los niveles de E-selectina. La activación de TLR4 por LPS en FC, indujo un aumento en la expresión de Eselectina, situación que es revertida con el pre tratamiento con TAK-242 (inhibidor de TLR4). Adicionalmente, la activación de TLR4 generó un aumento en la adhesión de monocitos sobre los FC, mientras que la inhibición de TLR4 y las vías transduccionales ERK1/2, PI3K/Akt y NF-κB previo al estímulo con LPS, revirtió el aumento de adhesión de monocitos. De igual forma, el bloqueo de E-selectina, mediante el uso de un anticuerpo bloqueante, también revirtió el aumento de la adhesión, dando luces de que esta proteína de adhesión es fundamental para el reclutamiento de monocitos y por tanto para mediar la respuesta inflamatoria orquestada por el FC

Cardiac fibroblasts (CF) have been considered as sentinel cells, since they respond in a complex and diverse manner to external and internal stimulus, in orden to maintein homeostasis of the heart. This is mediated through a wide number of receptor, among then Toll-Like receptors, an particulary TLR4, play a critical role in cardiac inflammation. TLR4 activation has been involved in the regulation of inflammatory and fibrotic response both in CF and other cells; adhesion molecules and recruiment of immune cells are key elements of these process. Therefore we sought to evaluate whether TLR4 activation in CF obteined from adults rats increased monocyte adhesion trough increased levels of E-selectin. TLR4 activation by LPS in CF, induce increased in E-selectin expression, which was abolished when CF were pre treatment with TAK-242 (TLR4 inhibitor). In adittion, TLR4 activation increased monocyte adhesion to CF, whereas the inhibition of this receptor and releated signaling pathway ERK1/2, PI3K/Akt and NF-κB, previous LPS exposure reverse monocyte adhesion. Similarly, E-selectin blockade, by the use of blocking antibody, also blocked monocyte adhesion, which a yeast the importance of this adhesion molecule in monocyte recruitment and inflammatory response orchestrated by CF