Asociación de polimorfismos genéticos en NAT2 con el daño hepático inducido por isoniacida, en pacientes con tuberculosis activa o latente

Abstract

La tuberculosis es una enfermedad infectocontagiosa producida principalmente por la bacteria Mycobaterium tuberculosis. Actualmente, según la OMS, tiene a un tercio de la población mundial contagiada. En Chile, se estima que en el año 2015 hubo 211 personas fallecidas producto de esta infección. El tratamiento para esta enfermedad está bien documentado, dentro del mismo, uno de los fármacos más importantes es isoniacida, por ser bien tolerado, tener buena capacidad bactericida y ser de bajo costo. El régimen con este medicamento puede producir reacciones adversas, siendo la más grave la hepatotoxicidad, que puede causar la interrupción del tratamiento, e incluso en casos más severos, producir una hepatitis fulminante. Se ha determinado que la RAM hepatotóxica, puede llegar a ocurrir en un 36% de los pacientes. En la metabolización de isoniacida, la acetilación del fármaco por la enzima N-acetiltransferasa 2 (NAT2), es esencial. Ha sido descrito que existen polimorfismos en el gen de NAT2 que provocan una actividad metabólica diferencial de la enzima. Determinados polimorfismos genéticos permiten establecer tres posibles velocidades de acetilación: rápida, intermedia y lenta. El fenotipo acetilador lento, conduciría a un aumento de la aparición de hepatotoxicidad por uso de isoniacida, aunque existen estudios que refutan lo anterior y confieren la aparición de la RAM al fenotipo acetilador rápido. En poblaciones caucásicas los polimorfismos más estudiados de NAT2, que se encuentran relacionados a la reacción adversa de isoniacida, son C282T, A803G, T341C y G590A, de estos, destacan C282T y G590A por su relevancia en estudios publicados recientemente. En Chile no existen estudios que informen sobre la presencia de los polimorfismos de NAT2 y su relación con la hepatotoxicidad inducida por isoniacida. De acuerdo con estos antecedentes se propuso la siguiente hipótesis de trabajo: La presencia de los polimorfismos C282T (rs1041983) y G590A (rs1799930) del gen codificante para la enzima NAT2 se asocia(n) con la aparición de reacciones adversas de tipo hepáticas, por el uso de isoniacida incluida en el tratamiento de pacientes con tuberculosis activa o latente, en Chile. Para responder la hipótesis se planteó como objetivo general: Estudiar la asociación entre la presencia de los polimorfismos C282T (Rs1041983) y G590A (Rs1799930) de NAT2 y el desarrollo de hepatotoxicidad como reacción adversa a isoniacida (RAM) en pacientes con tuberculosis activa o latente. Para llevar a cabo el objetivo, se realizó un estudio epidemiológico caso-control, obteniendo un total de 37 muestras que fueron utilizadas en los análisis y que luego se procesaron mediante sondas TaqMan®. Se evaluó la presencia de los polimorfismos a través de Real-Time PCR. Se encontró que en un 32,43% del total de pacientes estudiados, presentaron hepatotoxicidad. Además, dentro de los análisis, fue determinada la frecuencia de los polimorfismos en la población estudiada, observando en ella que para la variante rs1041983 la frecuencia para el alelo T es de 34% y para la variante rs1799930, la frecuencia para el alelo A es de un 11%. Por último, en los análisis estadísticos, se observa que para la variante rs1041983 existe un OR de riesgo de 7,50 para modelo de herencia dominante. Esta misma variante al ser evaluada en un modelo multivariado junto a los factores no genéticos IMC y edad, se consigue un modelo con significancia estadística y con un pseudo R2 de 29%. Para los análisis sobre el aumento de GPT basal, no se obtuvieron resultados tan significativos como para lo anterior. Este es un primer paso para conocer qué ocurre con la hepatotoxicidad inducida por isoniacida en nuestro país, y la posible relación que variantes genéticas como rs1041983 tienen en la aparición de esta reacción adversa

Tuberculosis is an infectious disease caused mainly by the bacterium Mycobaterium tuberculosis. Currently, according to WHO, it has a third of the world's population infected. In Chile, it is estimated that in 2015 there were 211 people who died as a result of this infection. The treatment for this disease is well documented, within it, one of the most important drugs is isoniazid, as it is well tolerated, has good bactericidal capacity and is low cost. The regimen with this medicine can produce adverse reactions, the most serious being hepatotoxicity, which can cause the interruption of treatment, and even in more severe cases, produce fulminant hepatitis. It has been determined that hepatotoxic ADR can occur in 36% of patients. In the metabolization of isoniazid, acetylation of the drug by the enzyme N-acetyltransferase 2 (NAT2) is essential. It has been described that there are polymorphisms in the NAT2 gene that cause a differential metabolic activity of the enzyme. Certain genetic polymorphisms make it possible to establish three possible acetylation rates: fast, intermediate and slow. The slow acetylator phenotype would lead to an increase in the appearance of hepatotoxicity due to the use of isoniazid, although there are studies that refute the above and confer the appearance of ADR to the fast acetylator phenotype. In Caucasian populations, the most studied NAT2 polymorphisms, which are related to the adverse reaction of isoniazid, are C282T, A803G, T341C and G590A, of these, C282T and G590A stand out due to their relevance in recently published studies. In Chile there are no studies reporting the presence of NAT2 polymorphisms and their relationship with isoniazid-induced hepatotoxicity. In accordance with these antecedents, the following working hypothesis was proposed: The presence of polymorphisms C282T (rs1041983) and G590A (rs1799930) of the gene encoding the NAT2 enzyme is associated with the appearance of hepatic-type adverse reactions, for the use of isoniazid included in the treatment of patients with active or latent tuberculosis, in Chile. To answer the hypothesis, the general objective was: To study the association between the presence of polymorphisms C282T (Rs1041983) and G590A (Rs1799930) of NAT2 and the development of hepatotoxicity as an adverse reaction to isoniazid (ADR) in patients with active or latent tuberculosis. To carry out the objective, a case-control epidemiological study was carried out, obtaining a total of 37 samples that were used in the analyzes and which were then processed using TaqMan® probes. The presence of the polymorphisms was evaluated through Real-Time PCR. It was found that in 32.43% of the total of patients studied, they presented hepatotoxicity. In addition, within the analyzes, the frequency of polymorphisms in the studied population was determined, observing in it that for the variant rs1041983 the frequency for the T allele is 34% and for the variant rs1799930, the frequency for the allele A is of 11%. Finally, in the statistical analyzes, it is observed that for the rs1041983 variant the OR was 7.50 for the dominant inheritance model. This same variant when evaluated in a multivariate model together with the non-genetic factors BMI and age, a model with statistical significance and a pseudo R2 of 29% was achieved. For the analyzes on the increase in baseline GPT, results were not as significant as for the above. This is a first step to know what happens with isoniazid-induced hepatotoxicity in our country, and the possible relationship that genetic variants such as rs1041983 have in the appearance of this adverse reaction