Asociación entre variantes genéticas relacionadas con el metabolismo del esquema FOLFOX, infiltración tumoral de linfocitos y variables clínicas, y la sobrevida global en cáncer colorrectal metastásico

Abstract

El cáncer colorrectal (CRC) es considerado como una de las enfermedades con mayor relevancia en Chile. Los principales tratamientos de este cáncer se basan en la cirugía del tumor, seguido de quimioterapia adyuvante basada en 5-FU, conocida como esquema FOLFOX (5-fluorouracilo, leucovorina y oxaliplatino). Se han descrito polimorfismos genéticos relacionados con las enzimas que eliminan y son blancos de 5-FU, tales como Timilato Sintasa (TYMS) y Dihidropirimidina Deshidrogenasa (DPYD). Por otra parte, también se han descrito polimorfismos que afectan la eliminación de oxaliplatino, principalmente GSTs (GSTP1). Sin embargo, los resultados de la asociación entre la presencia de los polimorfismos genético y la eficacia del esquema FOLFOX, han sido controversiales. Por otra parte, se ha observado que distintos microambientes inmunológicos en el tumor pueden generar inmunosensibilidad a la quimioterapia, influyendo en la sobrevida del paciente. Frente a el porcentaje de infiltración de linfocitos T podría llegar a ser utilizados como un marcador pronóstico de la enfermedad. De acuerdo con lo anterior, el presente trabajo tiene por objetivo estudiar retrospectivamente la asociación entre la respuesta terapéutica al esquema FOLFOX/CapeOX, las variaciones genéticas en TYMS, DPYD y GSTP1, y la infiltración tumoral en pacientes con cáncer colorrectal metastásico. Para cumplir los objetivos se realizó extracción de ADN de muestras de biopsia de pacientes con mCRC (n=51 pacientes) y se analizaron variables genéticas de TYMS, DPYD y GSTPI mediante PCR en tiempo real asociado a sondas TaqMan®. Los genotipos se asociaron con TILs y con variables clínicas obtenidas desde las fichas de los pacientes. Se realizaron análisis de sobrevida de cada variable mediante la construcción de curvas de Kaplan-Meir y test de log-rank. Posterior a eso se realizó un análisis multivariado mediante un modelo de Regresión de Cox. Se observó una relación significativa, con la sobrevida global, en las variables GSTP1 (HR=2,03 p-value=0,048 IC95%= 1,00-4,10), DPYD (HR=2,42 p-value=0,016 IC95%=1,176-5,016), la presencia de metástasis hepáticas (HR=4,21 p-value=0,21 IC95%=1,24-14,28) y el modelo de metástasis: Solo hepática (HR=3,9 p-value=0,039), hepática más otra (HR=4,6 p-value=0,022). En relación con el análisis multivariado se observa, con significancia estadística, que el alelo C de la variante genética en DPYD y no completar los 12 ciclos del esquema FOLFOX/CapeOX, aumentan su significancia (HR=6,97 p-value=0,002 y HR=6,69 p-value=0,017, respectivamente). En conclusión, nuestros resultados muestran que existe una relación entre variantes genéticas de GSTP1 y DPYD con las variables clínicas (presencia de metástasis hepáticas y completar los ciclos del esquema FOLFOX) con un aumento en la sobrevida de los pacientes con mCRC. Interesantemente variables genéticas de TYMS parecen ser promisorias, aun cuando no se alcanzó una significancia estadística, posiblemente debido al aún bajo tamaño muestral. Estos resultados, a futuro, pueden dar pie a la construcción de un modelo de predicción de respuesta al esquema FOLFOX en pacientes con cáncer colorrectal en Chile

Colorectal cancer (CRC) is considered one of the most important diseases in Chile. The main treatments for this cancer are based on tumor surgery, followed by adjuvant chemotherapy based on 5-FU, known as the FOLFOX scheme (5-fluorouracil, leucovorin and oxaliplatin). Genetic polymorphisms related to the enzymes that eliminate and are targets of 5-FU have been described, such as Thymidilate Synthase (TYMS) and Dihydropyrimidine Dehydrogenase (DPYD). On the other hand, polymorphisms affecting elimination of oxaliplatin, mainly GSTs (GSTP1), have also been described. However, the results of the association between the presence of genetic polymorphisms and the efficacy of the FOLFOX scheme have been controversial. On the other hand, it has been observed that different immunological microenvironments in the tumor can generate immunosensitivity to chemotherapy, influencing the patient's survival. Against the percentage of infiltration of T lymphocytes, it could be used as a prognostic marker of the disease. In accordance with the above, the present work aims to retrospectively study the association between the therapeutic response to the FOLFOX / CapeOX scheme, the genetic variations in TYMS, DPYD and GSTP1, and tumor infiltration in patients with metastatic colorectal cancer. To achieve the objectives, DNA was extracted from biopsy samples from patients with mCRC (n = 51 patients) and genetic variables of TYMS, DPYD and GSTPI will be analyzed using real-time PCR associated with TaqMan® probes. Genotypes were associated with TILs and clinical variables obtained from patient records. Survival analysis of each variable was performed by building Kaplan-Meir curves and log-rank test. After that, a multivariate analysis was performed using a Cox Regression model. A significant relationship was observed, with the overall survival, in the variables GSTP1 (HR = 2.03 p-value = 0.048 95% CI = 1.00-4.10), DPYD (HR = 2.42 p-value = 0.016 95% CI = 1.176-5.016), the presence of liver metastases (RH = 4.21 p-value = 0.21 95% CI = 1.24-14.28) and the metastasis model: Hepatic only (RH = 3, 9 p-value = 0.039), liver plus another (HR = 4.6 p-value = 0.022). In relation to the multivariate analysis, it was observed that C allele of DPYD and not finishing the 12 cycles of the FOLFOX/CapeOX scheme, increase the significance (HR = 6.97 p-value = 0.002 and HR = 6.69 p-value = 0.017, respectively). In conclusion, our results show a relationship between genetic variants of GSTP1 and DPYD with clinical variables (presence of liver metastases and complete cycles of the FOLFOX scheme) with an increase in the survival of patients with mCRC. Genetic variables of TYMS appear to be promising, even when statistical significance was not reached, possibly due to the still small sample size. These results, in the future, may lead to the construction of a prediction model of response to the FOLFOX scheme in patients with colorectal cancer in Chile