Formulación de una vacuna de inmersión a partir de una cepa de Renibacterium salmoninarum con baja producción de la proteína P57 y evaluación de la inducción de inmunidad en trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss)
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2022Metadata
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Alvarez Armijo, Sergio Anibal
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Formulación de una vacuna de inmersión a partir de una cepa de Renibacterium salmoninarum con baja producción de la proteína P57 y evaluación de la inducción de inmunidad en trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss)
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Bacterial Kidney Disease (BKD), cuyo agente etiológico es el cocobacilo Gram positivo Renibacterium salmoninarum, es una enfermedad infecciosa que amenaza el desarrollo de la salmonicultura chilena. Durante las últimas décadas se ha buscado formular una vacuna que resulte en una alta protección de los salmones frente a la infección, sin resultados prometedores. Para alcanzar esta meta, impedir la síntesis de uno de los factores de virulencia mejor descritos en el patógeno, la proteína Major Soluble Antigen (MSA) o p57, podría ser clave. El objetivo de este trabajo fue obtener o seleccionar aislados de R. salmoninarum hipo productores de p57, para, a partir de estos, formular prototipos vacunales y evaluar su efectividad in vivo en el desarrollo de respuesta inmune. Mediante las metodologías aplicadas se obtuvieron tres aislados: P10, MNII-KDM2 y MNII-TYC. El grupo de peces inmunizado con la formulación MNII-KDM2 mostró un aumento significativo en la trascripción de los genes ifn-γ y cd4, lo que sugiere la activación de una respuesta celular (linfocitos Th1) y humoral (IFN-γ). Se deben realizar estudios posteriores de supervivencia para comprobar la capacidad protectora real de esta vacuna Bacterial Kidney Disease (BKD), whose etiological agent is the Gram-positive coccobacillus Renibacterium salmoninarum, is an infectious disease that threatens the development of Chilean salmon farming. During the last decades, efforts have been made to formulate a vaccine that would result in a high protection of salmon against the infection, without promising results. To achieve this goal, preventing the synthesis of one of the best described virulence factors in the pathogen, the Major Soluble Antigen (MSA) or p57 protein, could be key. The objective of this work was to obtain R. salmoninarum isolates with a lower cellular level of p57, and to formulate vaccine prototypes with these bacteria with the aim to show it effectivity in vivo. We obtained three isolates (P10, MNII-KDM2 and MNII-TYC) by the application of a variety of methodologies. The group of fish immunized with MNII-KDM2 formulation showed a significant overexpression of the genes ifn-γ and cd4. This upregulation could be evidence of the activation of cellular (Th1 lymphocytes) and humoral (IFN-γ) response. Futher investigation through survival assays must be done to determine de actual vaccine effectivity
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Tesis presentada a la Universidad de Chile para optar al grado de Magíster en Bioquímica área de Especialización en Bioquímica de Proteínas y Biotecnología Memoria para optar al Título de Bioquímico
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URI: https://repositorio.uchile.cl/handle/2250/189059
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