Caracterización molecular del psílido de la malva (Hemiptera: Psyllidae), capturado en huertos de peral (Pyrus communis L.) en Chile y evaluación de su capacidad de transmisión de Candidatus Phytoplasma puni (CEPA 16SrIII-J)

Abstract

En la localidad de Graneros, región de O´Higgins, Chile, se identificó a el psílido de la malva (Russelliana solanicola Tuthill, 1959) proveniente de Malva nicaeensis L., como un posible vector de `Candidatus Phytoplasma pruni´. Durante unperiodo de 8 meses se recolectaron 1.700 especímenes de Psylloidea, incluidos inmaduros y adultos, los cuales se utilizaron en pruebas de transmisión en plantas de vinca. Mediante nested-PCR, utilizando parejas de partidores para la detección de fitoplasmas en los genes 16S rRNA e IdpA, se encontró que 7 de las 113 plantas de vinca utilizadas en las pruebas de transmisión estaban infectadas con fitoplasmas. Los insectos que se alimentaron de estas plantas también dieron amplificaciones positivas para los mismos fitoplasmas. Nunca se obtuvo un producto de amplificación utilizando pares de partidores para el gen SAP54. Un análisis de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción virtual (RFLP), realizado con la herramienta iPhyClassifier, indicó que el fitoplasma encontrado tanto en las plantas de vinca como en los insectos utilizados en las pruebas de transmisión pertenece al subgrupo ribosomal 16SrIII-J. El gen COI del psílido fue amplificado y secuenciado, mostrando un 85% de similitud con R. solanicola de Solanum tuberosum L. Además, se secuenció el genoma mitocondrial del psílido, revelando una molécula circular de ADN de 14.750 pb con 35 genes. El psílido de la malva es un vector del fitoplasma 16SrIII-J. La identificación molecular del insecto no coincide con la identificación morfológica, lo que indica que el psílido de la malva podría constituir una especie críptica dentro del complejo Russelliana solanicola. La cepa del fitoplasma 16SrIII-J asociada al psílido de la malva no posee el efector SAP54.

In Graneros locality, O´Higgins region, Chile, the “mallow” psyllid (Russelliana solanicola Tuthill, 1959) from Malva nicaeensis L., was identified, as a potential vector of ´Candidatus Phytoplasma pruni´. Over an 8-month period, 1,700 specimens of Psylloidea, including nymphs and adults, were collected and used for transmission trials in periwinkle plants. By nested-PCR, using primers pairs for phytoplasmas detection in 16S rRNA and IdpA genes, 7 out of 113 periwinkle plants used in transmission trials were found infected by phytoplasmas. Insects that fed on these plants also tested positive for the same phytoplasmas. An amplification product was never obtained using primer pairs for the SAP54 gene. A virtual restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis using the iPhyClassifier tool indicated that the phytoplasma found both in periwinkle plants and insects used in transmission trials, is a member of the 16SrIII-J ribosomal subgroup. The psyllid COI gene was amplified and sequenced, showing 85% similarity to R. solanicola from Solanum tuberosum L. The mitochondrial genome of the psyllid was also sequenced, revealing a 14,750 bp circular DNA molecule with 35 genes. The mallow psyllid is a vector of the phytoplasma 16SrIII-J. The molecular identification of the insect does not match the morphological one, indicating that the mallow psyllid may constitute a cryptic species within the polyphagous Russelliana solanicola complex. The strain of the phytoplasma 16SrIII-J associated with the mallow psyllid does not have the SAP54 effector.