Detección mediante inmunohistoquímica de Piscirickettsia salmonis en cortes de tejido de Caligus rogercresseyi

Abstract

La piscirickettsiosis, cuyo agente etiológico es la bacteria Piscirickettsia salmonis, y la caligidosis, una ectoparasitosis producida por Caligus rogercresseyi, constituyen los principales problemas sanitarios que afectan a la industria del cultivo del salmón en Chile. Diversos autores han sugerido que el parásito pueda ser vector y/o reservorio para P. salmonis. En el presente trabajo, se recolectaron muestras de Caligus rogercresseyi, durante el período verano-otoño de 2016, desde un centro de engorda de salmón del Atlántico (Salmo salar), ubicado en la Región de Los Lagos. El lugar presentaba un brote de piscirickettsiosis en el momento de la toma de muestra, con una mortalidad semanal superior a 5%. Para el muestreo se eligieron peces parasitados (n=50) con Caligus, con un peso promedio de 3 kg, seleccionando aquellos en los que se evidenciaban signos y síntomas concordantes con piscirickettsiosis. De los peces se seleccionaron los parásitos al azar, considerando cinco hembras (H), cinco machos (M) y cinco chalimus IV (C), resultando un total de 15 parásitos por jaula (n=10), lo que dio un total de 150 individuos muestreados. Las muestras fueron procesadas para cortes incluidos en parafina para realizar estudios histológicos e inmunohistoquímicos para la detección de P. salmonis en los tejidos del parásito. Del total de individuos analizados un 32,6% fueron positivo a P. salmonis, de los cuales un 42% fueron hembras, 28% machos y 28% chalimus IV. Además, la bacteria fue detectada en sistema muscular, digestivo y reproductor. Adicionalmente, las hembras positivas, se evaluaron mediante microscopía electrónica de barrido, observándose que P. salmonis se encontraba formando conglomerados de bacterias unidas por un material amorfo, que además, lo adhería al borde exterior de la bolsa ovígera. En conclusión, los resultados demuestran que el agente está presente en distintos tejidos del ectoparásito, por ende, existe la posibilidad de que éste pueda participar en el ciclo de la piscirickettsiosis, constituyéndose como un vector de P. salmonis en el medio marino.

Piscirickettsiosis, whose etiological agent is the bacterium Piscirickettsia salmonis, and caligidosis, an ectoparasitosis caused by Caligus rogercresseyi, constitute the major health problem affecting the salmon farming industry in Chile. Various authors have suggested that the parasite might be a vector and/or reservoir for P. salmonis. For this study, samples of Caligus rogercresseyi were collected during the 2016 summer-autumn period from an Atlantic salmon (Salmo salar) growing center, located in the Region de Los Lagos. The site exhibited a piscirickettsiosis outbreak at the sampling time with a weekly mortality of over 5%. For the sampling procedure, fish (n = 50) parasitised by Caligus rogercresseyi with a 3 kg average weight and showing signs and symptoms concordant with piscirickettsiosis were chosen. Parasites selected at random from the fish included five females, five males and five chalimus IV, with a total of 15 parasites per cage (n = 10), and a total of 150 sampled individuals. The samples were processed for paraffin-embedded sections to carry out histological and immune-histochemical analyses for P. salmonis detection in the parasite tissues. Out of the total of analysed individuals, 32.6% proved positive to P. salmonis, 42% of which were females, 28% males and 28% chalimus IV. Besides, the bacterium was detected in the muscular, digestive and reproductive systems of the parasite. Moreover, in examining the C. rogercresseyi females positive to P. salmonis by scanning electron microscopy it was observed that P. salmonis appeared forming conglomerates of bacteria held together by an amorphous material that also attached itself to the outer layer of the egg capsule. To conclude, the results demonstrated that the bacterial agent occurs in different tissues of the ectoparasite and, therefore, it is likely that this latter takes part in the piscirickettsiosis cycle, thus being a potential vector for P. salmonis.