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Efecto de NGF y P75NTR sobre el desarrollo folicular en ratas al termino del período reproductivo

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Publication date
2008
Metadata
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Cómo citar
Paredes Vargas, Alfonso
Cómo citar
Efecto de NGF y P75NTR sobre el desarrollo folicular en ratas al termino del período reproductivo
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Author
  • Acuña Rodríguez, Eric M.;
Professor Advisor
  • Paredes Vargas, Alfonso;
Abstract
El cese de la función ovárica está dado principalmente por la pérdida del número de folículos primordiales. Durante el envejecimiento, existe un decrecimiento en el número de folículos ováricos. En mujeres se ha establecido el periodo de subfertilidad después de los 37 años, cuando quedan menos de 100.000 folículos. En roedores, este período es caracterizado por disminución de la ciclicidad estral, del número de partos y de crías nacidas vivas por cada hembra. En este trabajo, se determinó el período de subfertilidad y el término del período reproductivo en ratas Sprague Dawley (SD). Desde los 8 meses se observaron cambios importantes en ratas, como disminución de estradiol y androstenediona, variación en los niveles de progesterona, aumento de la Noradrenalina (NA) ovárica y adrenal, además, de la disminución de la ciclicidad estral y fertilidad. El contenido intraovárico del factor de crecimiento nervioso (NGF), no cambia durante el período de subfertilidad. Sin embargo, aumenta significativamente a los 16 meses de edad, cuando la rata es infértil. Estos resultados permiten establecer el período de subfertilidad de la rata entre los 8 a 10 meses de edad. Después de esta caracterización se usaron ratas en el período de subfertilidad, para determinar si NGF y su receptor de baja afinidad p75NTR, son parte de un posible mecanismo que participa en este período. Para ello se administró localmente en el ovario una minibomba osmótica que infundió una mezcla de anticuerpo anti NGF con oligonucleótido antisentido contra mRNA de p75NTR . Después de 28 días de perfusión continua, se observó una sobreproducción de NGF intraovárico, el que posiblemente junto con el bloqueo de la traducción de p75NTR provocó: un aumento de androstenediona en plasma, pérdida de la ciclicidad estral, disminución del contenido de NA en médula adrenal, ganglio celíaco y ovario, encontrado al final del período observado. Además, hubo un aumento en el número de folículos saludables antrales y preantrales, y un aumento de estructuras quísticas, folículos tipo III y folículos luteinizados. La administración de la minibomba osmótica con anticuerpo contra NGF y el oligonucleótido antisentido tuvo un mayor efecto en los ovarios de rata de 8 meses que en los de 10 meses de edad y afecta a los dos ovarios por igual, tanto al que está conectado con la minibomba como al ovario contralateral. Los cambios morfológicos observados en ovario de rata de 8 meses de edad sugieren que un incremento en la actividad nerviosa simpática adelanta el envejecimiento reproductivo ovárico, proceso regulado por control neurotrófico intraovárico.
 
The cessation of reproductive function is mostly due to lost of primordial follicles pool. During aging, there is a decreased in the number of ovarian follicles. In women, the subfertility period was found from 37 years, when the number of follicles are smaller than 100.000. In rodents, this period is characterized for the lost of estrual cycling activity, decrease in the number of pups and deliveries by the female. In the present work, we determined the period of subfertility and the end of the reproductive period in Sprague Dawley (SD) rats. Since 8 month old we found important neuroendocrine changes in rats a such as decrease of estradiol and androstenedione, changes in progesterone, increase in ovarian and adrenal noradrenaline (NA). In addition, there was a decrease of estrual cyclicity and fertility. There were not changes in the nerve growth factor (NGF) at period of subfertility, but NGF was increased at 16 months, when the rat is infertile. Altogether these dates permitted us to define the period of subfertility betwen 8 to 10 months for the Sprague Dawley rat. After this characterization we used rats during the period of subfertility, to determine if NGF and its low affinity p75NTR receptor were involved in the possible mechanisms resulting in the end of ovary function. For that, we used Alzet osmotic minipumps to infuse one rat ovary with a mix of neutralizing antiserum to NGF in conjunction with an antisense oligodeoxynucleotide to mRNA p75 NGFR . After 28 days of continuous perfusion, we observed an overproduction of ovarian protein NGF, which together with the blockade of translation of p75NTR, could be the responsible of the: increase in serum androstenedione, lost of the cyclicity, decrease of NA content from the adrenal medulla, celiac ganglion and ovary, found at the end of observation. In addition, there was an increase in the number of antral and preantral healthy follicles and an increase in cystic structures; follicles type III and luteinizing follicles. The effect of the neutralizing antiserum to NGF with the antisense oligodeoxynucleotide to p75NTR was stronger in the ovary of rats of 8 month old than that in the ovary of rats of 10 month old. In both cases, the effect was the same for contralateral ovary (without miniosmotic pump). The morphological changes found in the ovary of rats of 8 month old suggest that an increasing sympathetic nerve activity accelerated ovarian reproductive aging in a process regulated by intraovarian neurotrophic control
 
General note
Memoria para optar el título de Bioquímico
Identifier
URI: https://repositorio.uchile.cl/tesis/uchile/2008/qf-acuna_e/html/index-frames.html
https://repositorio.uchile.cl/handle/2250/105694
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