Caracterización de la expresión de receptores purinérgicos de tipo p2y en músculo masetero de ratón

Abstract

El sistema masticatorio es una estructura compleja, cuya actividad requiere la contracción de distintos músculos de cabeza y cuello para lograr un movimiento eficaz y preciso. Los músculos masticatorios juegan un rol fundamental en la mantención de la posición y coordinación del movimiento mandibular, y sus características anatómicas, histológicas y bioquímicas pueden variar frente a diferentes estímulos tanto fisiológicos, como patológicos. Los cambios adaptativos y/o patológicos que experimenta el músculo esquelético conllevan a la liberación de diferentes mioquinas, que pueden tener efectos autocrinos, paracrinos o endocrinos. Las rutas de señalización asociadas a su producción han sido estudiadas en músculos de tronco y extremidades, y dentro de ellas se encuentra la señalización por ATP extracelular. En los últimos años se le ha asignado un nuevo rol a esta molécula, participando como un intermediario fundamental en los procesos de plasticidad muscular a través del “Acoplamiento Excitación-Transcripción”. Si bien, esta ruta ha sido muy estudiada en músculos de tronco y extremidades, se desconoce su relevancia en la fisiología de los músculos masticatorios, que son bioquímica y estructuralmente distintos al resto de los músculos del cuerpo. Para estudiar esta ruta de señalización en los músculos masticatorios es fundamental conocer si sus componentes moleculares se encuentran presentes, razón por la que en el presente trabajo se utilizaron músculos maseteros de ratones BalbC machos de 6-8 semanas de edad, aislados y procesados inmediatamente para extracción de ARN total, extracción de proteínas o criocortes histológicos para caracterizar la expresión de los distintos subtipos de receptores de tipo P2Y. A través de qPCR, se logró demostrar que este músculo expresa ARNm de los receptores de tipo P2Y1, P2Y2, P2Y6, P2Y12 y P2Y14 en razón P2Y1>P2Y12>P2Y2=P2Y6=P2Y14. Además, a través de inmunoblot se comprobó 12 la expresión proteica de dichos subtipos P2Y, además de P2Y4. Por medio de inmunofluorescencia en un corte transversal, se determinó que estos receptores se visualizan tanto en la superficie (sarcolema), como en el interior de la fibra, lo que podría corresponder a la vía exocítica, o a su presencia en túbulos T. La presencia de estos receptores en músculo masetero de ratón sugiere que las vías de señalización mediadas por ATP extracelular podrían estar presentes en músculos masticatorios, con lo cual se podrá avanzar en la identificación del rol de estos receptores en la fisiología de los músculos masticatorios. Reconocer la relevancia de la señalización por ATP extracelular en fenómenos fisiológicos y/o patológicos que conlleven la remodelación muscular permitirá desarrollar opciones terapéuticas y moleculares para patologías del sistema músculoesquelético en el aparato masticatorio.