Efecto antiinflamatorio de la boldina sobre macrófagos humanos estimulados con exudado periapical de pacientes con periodontitis apical asintomática

Abstract

Introducción: La periodontitis apical asintomática (PAA) es un cuadro crónico caracterizado por la infección del sistema de canales radiculares, inflamación con destrucción del periodonto apical y ausencia de sintomatología clínica. Se han estudiado compuestos naturales como la boldina, un alcaloide del boldo chileno, para tratar patologías inflamatorias. Sin embargo, no se ha determinado el efecto antiinflamatorio de la boldina sobre la respuesta inflamatoria en PAA. Objetivo: Determinar el efecto antiinflamatorio de boldina sobre macrófagos humanos estimulados con exudado periapical. Metodología: Se incluyeron muestras de exudado periapical a partir de pacientes con PAA (N=14), y se determinó la actividad endotóxica mediante ensayo LAL. Posteriormente, monocitos humanos THP-1 fueron diferenciados a macrófagos con 10 nM de PMA por 24 horas y se estimularon por 1 hora con exudado periapical (1,5 UE/ml – 3,1 UE/ml), y se determinó la expresión relativa de TNF-α mediante qPCR. Finalmente, se evaluó el efecto del clorhidrato de boldina (50 μg/ml y 100 μg/ml) sobre la expresión relativa de TNF-α en macrófagos estimulados con exudado periapical (3,1UE/ml), controles sin clorhidrato de boldina y controles sin estimular con exudado periapical. El análisis estadístico se realizó mediante Test de ANOVA con prueba de Bonferroni post-hoc usando el programa STATA 12®. Resultados: Se determinó un promedio de endotoxinas de 631,4 UE/ml en las muestras de exudado periapical. Se observaron aumentos estadísticamente significativos en la expresión relativa de ARNm de TNF-α en macrófagos estimulados con 3,1 EU/ml de exudado, versus los grupos estimulados con 1,5 UE/ml de exudado y sin estimular. Los niveles de ARNm de TNF-α disminuyeron de forma estadísticamente significativa en macrófagos estimulados con exudado periapical (3,1 EU/ml) expuestos a boldina (100 μg/ml). En estos últimos se

alcanzaron niveles ARNm de TNF-α comparables con el grupo control no estimulado. Conclusiones: El exudado periapical de pacientes con PAA genera un aumento dosis-dependiente en la expresión génica de TNF-α. La boldina (100 μg/ml) redujo la expresión génica de TNF-α en macrófagos estimulados con exudados periapicales de PAA.