Cultivo y aplicación de células madre pulpares humanas en proceso reparativo en modelo in vivo : análisis descriptivo

Abstract

El hueso puede regenerarse a sí mismo después de pequeñas lesiones, pero esta capacidad es limitada en caso de lesiones extensas. La medicina regenerativa e ingeniería tisular disponen de células madre como estrategia para recuperar aquellos tejidos muy dañados o perdidos. Una alternativa son las células madre de pulpa dentaria humana (hDPSC), sin embargo, la literatura existente es amplia, y diversos métodos de obtención, cultivo y aplicación, plantean la necesidad de desarrollar procedimientos estandarizados y protocolizados. La Odontología y Medicina basada en la Evidencia plantea que la evidencia científica logra su objetivo final cuando los protocolos descritos son adaptados e implementados a la realidad local, con resultados equivalentes a los reportados en la literatura. El objetivo de este trabajo fue implementar un protocolo de obtención y cultivo de hDPSC en la FOUCh y evaluar sus potencialidades regenerativas en un modelo in vivo de defecto crítico. Materiales y métodos: Se recuperó tejido pulpar de terceros molares humanos y mediante protocolo desarrollado, implementado y evaluado en Laboratorio de Histo-Morfología Oral FOUCh se obtuvo un cultivo primario de células pulpares. Las células fueron caracterizadas por citometría de flujo y ensayos de diferenciación in vitro. Para evaluar el potencial de regeneración ósea in vivo, las células pulpares fueron implantadas en defectos críticos de calota de ratón. Se recolectaron muestras a 30 días post-implantación para su análisis histomorfológico. Resultados: Se obtuvo una población celular con morfología fibroblástica, expresión de marcadores de superficie compatible con hDPSC y potencial de diferenciación in vitro a linaje osteoblástico y neuronal. El análisis histomorfológico de las muestras obtenidas mostró regeneración del defecto critico en comparación a grupo control. Se observó formación de tejido óseo, cartilaginoso y vascular, en grados variables de maduración. Conclusiones: El desarrollo de un protocolo de obtención y aislación de hDPSC en la FOUCh, permitió obtener una población celular competente en los procesos in vivo de regeneración de un defecto crítico de calota de ratón, sin embargo, futuros ensayos son necesarios para establecer la contribución especifica de las hDPSC en la regeneración del tejido.