Efecto citotóxico inducido por cationes lipofílicos deslocalizados derivados de ácidos polihidroxibenzoicos en combinación con doxiciclina en células de cáncer de pulmón

Abstract

El cáncer de pulmón tiene la mayor mortalidad entre todas las neoplasias, siendo la segunda causa de muerte en Chile, tiene origen multifactorial, pero se asocia fuertemente a estilos de vida y hábitos, siendo el tabaquismo el principal factor de riesgo. Posee un mal pronóstico en estados avanzados y gran capacidad de generar metástasis. La periodontitis, es una enfermedad inflamatoria crónica avanzada, y se ha propuesto como factor de riesgo de cáncer de pulmón a través de cambios en la respuesta inmune, y/o diseminación de bacterias patógenas. La hipótesis de células iniciadoras de tumores, sugiere que éstas son responsables del inicio y crecimiento tumoral, además son resistentes a tratamientos convencionales. Las mitocondrias de células tumorales pueden ser consideradas como blanco farmacológico, debido a que exhiben un mayor potencial de transmembrana, siendo susceptibles de ser blanco de moléculas cargadas positivamente. Los cationes lipofílicos deslocalizados de trifenilfosfonio (TPP+ ) son moléculas sintetizadas a partir de los Ácidos Gálico, Gentísico, protocatéquico y el ácido 2-hidroxibenzoico, unidas a TPP+ y que pueden ser dirigidos a las mitocondrias, para causar un estrés energético y conducir las células a apoptosis. Doxiciclina es un antibiótico del grupo tetraciclina, con actividad citotóxica mediante inhibición de la biogénesis mitocondrial en células tumorales. Se evaluó la existencia de células iniciadoras de tumores, también los efectos citotóxicos de cada una de las moléculas, los efectos de los compuestos en las mitocondrias a través de medición de ATP mitocondrial y potencial de transmembrana mitocondrial. Además, se evaluó el efecto resultante de la combinación entre derivados de polihidroxibenzoatos y doxiciclina en líneas celulares de cáncer de pulmón. Los cultivos celulares se realizaron en condiciones de hipoxia y normoxia, luego se incubaron con la combinación de respectivas moléculas durante 72 horas. La viabilidad celular se evaluó usando un ensayo MTT. Los resultados muestran que las moléculas de cationes lipofílicos deslocalizados tienen un efecto citotóxico en las líneas tumorales, que es dependiente del tiempo y de la concentración. El compuesto Gentísico-TPP+C10 presenta una disminución del ATP y una caída en el potencial de transmembrana. Por otro lado, doxiciclina también tiene un efecto citotóxico en las líneas celulares, pero sin alteración en el contenido de ATP intracelular ni potencial de transmembrana mitocondrial. Las combinaciones de Gálico-TPP+C10 y doxiciclina / Gentísico-TPP+C10 y doxiciclina son prometedoras, ya que se observa el efecto de sinergia en un porcentaje considerable de combinaciones realizadas, incluso con valores inferiores a los IC50 de cada compuesto por separado. Se observó 2 tipos de efectos: aditivo y de sinergia, esta última es la más interesante, ya que la combinación de fármacos nos da un efecto citotóxico aún mayor que las combinaciones de aditividad, por lo cual los datos tienen que ser confirmados en experimentos in vivo y podrían representar una alternativa de tratamiento en el cáncer de pulmón.