Regeneración ósea y activación de osteoblastos en defectos óseos consecutivos a Periodontitis experimental en respuesta al tratamiento con vesículas extracelulares derivadas de linfocitos T reguladores

Abstract

Introducción: La periodontitis es una enfermedad crónica caracterizada por la destrucción progresiva e irreversible del hueso alveolar. Esta patología es impulsada por la respuesta inmune del hospedero, por un desequilibrio entre los linfocitos Th17, asociados a resorción ósea, y los linfocitos T reguladores (Tregs), asociados a regeneración ósea y a la diferenciación de osteoblastos. Existen estudios de terapias coadyuvantes para promover la recuperación del hueso alveolar, pero con resultados variables y poco reproducibles. Un estudio previo de nuestro grupo reportó que las vesículas extracelulares (EVs) son capaces de modular la respuesta inmune y la inflamación mediada por los linfocitos Th17 durante la periodontitis experimental, lo que se tradujo en una reducción de la resorción ósea alveolar. Sin embargo, el efecto directo de las vesículas extracelulares derivadas de Tregs (Treg-EVs) en la regeneración del hueso alveolar no ha sido demostrado. El objetivo de este estudio fue evaluar el impacto del tratamiento con Treg-EVs sobre la regeneración ósea y la activación de osteoblastos en defectos alveolares inducidos experimentalmente. Metodología: Se utilizó un estudio preclínico experimental en 24 ratones C57BL/6. La periodontitis experimental se indujo mediante una ligadura en los segundos molares durante 10 días. Los ratones con defectos óseos fueron asignados a grupos de periodontitis no tratados , periodontitis con vehículo (PBS) y periodontitis con tratamiento con Treg-EVs (10⁸ EVs en 5 μl de PBS) . El tratamiento consistió en dos inyecciones intragingivales. La formación de hueso alveolar se analizó mediante micro-CT para cuantificar el porcentaje de volumen óseo (%BV/TV) y la separación inter-trabecular (Tb. Sp). Adicionalmente, se empleó la técnica histoquímica con tinción de Hematoxilina y Eosina (H&E) y Fosfatasa Alcalina (ALP) para observar la estructura tisular e identificar osteoblastos activos (ALP+). Resultados: El tratamiento con Tregs-EVs produjo un incremento significativo en el %BV/TV respecto a los grupos con periodontitis no tratados y tratados con vehículo, acompañado de una reducción significativa de la Tb. Sp. El análisis histológico mostró activación de osteoblastos ALP+ en los animales tratados con EVs. 9 Conclusiones: El tratamiento con Tregs-Evs induce regeneración del hueso alveolar en defectos posteriores a periodontitis experimental y la activación de osteoblastos ALP+.