Determinación de la prevalencia de los genes que codifican la toxina cdt (cytolethal distending toxin) en aislados de actinobacillus actinomycetemcomitans de pacientes chilenos con enfermedad periodontal

Abstract

A. actinomycetemcomitans es considerado uno de los microorganismos que juega un rol importante en la enfermedad periodontal 8, 9, 10. Se caracteriza por ser un cocobacilo, Gram negativo, anaerobio facultativo que no posee movilidad. Es uno de los microorganismos que ha sido asociado con mayor frecuencia a la periodontitis agresiva 12, 13, 14. Posee numerosos factores de virulencia que le permitirían invadir el tejido conectivo gingival 15. Entre ellos se encuentra una toxina llamada cytolethal distending toxin (CDT), cuyas acciones conllevan a una inmunosupresión local y a la inhibición del desarrollo tanto de queratinocitos como de fibroblastos ya que interviene en la progresión del ciclo celular de manera irreversible 14, 20, 22, 23. Es así como, dicha toxina está siendo considerada entre los factores protagónicos de la patogénesis de la enfermedad periodontal. La holotoxina CDT es una molécula tripartita, compuesta por tres subunidades cdtA, cdtB y cdtC 24 las cuales están codificadas por tres genes contiguos, que conforman un operón, llamados de la misma manera que los polipéptidos que producen 18, 21, 25. Algunos autores han determinado que existe variabilidad en los genes que codifican la toxina CDT, encontrándose incluso aislados que no poseen ninguno de los tres genes 10, 23. En Chile no se han realizado estudios al respecto. El presente trabajo pretende demostrar la existencia de aislados de A. actinomycetemcomitans provenientes de pacientes chilenos con enfermedad periodontal que no poseen los genes cdtA, cdtB ni cdtC que codifican la toxina CDT. Y así mismo, se ha buscado caracterizar dichos genes cuando están presentes. Con este fin, los genes cdtA, cdtB y cdtC fueron amplificados, mediante PCR, y luego sometidos a restricción enzimática con 17 endonucleasas de restricción. El análisis de los productos de PCR provenientes de los aislados arrojó que existen muestras que no poseen los genes en estudio, determinándose una prevalencia del operón de un 64,6%. El resultado de las digestiones enzimáticas, por su parte, arrojó que no existe polimorfismo genético en el fragmento estudiado dentro de la población chilena, y que existiría diferencias en la secuencia de estos genes respecto a lo que se describe en la literatura y en la bases de datos del NCBI.