Producción de autoinductor-2 por Bifidobacterium dentium ATCC 27534 y sus efectos en la adhesión y formación de biopelículas
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2018Metadata
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Universidad de Chile
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Producción de autoinductor-2 por Bifidobacterium dentium ATCC 27534 y sus efectos en la adhesión y formación de biopelículas
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RESUMEN
Introducción: Bifidobacterium dentium es un microorganismo anaeróbico, Gram positivo, acidógeno y acidúrico, que ha sido aislada en la cavidad oral a partir de saliva y lesiones de caries, relacionándose al progreso de la caries dental. Junto a otros microorganismos, B. dentium puede formar parte de la biopelícula en la superficie dental, denominada placa dental, donde diferentes especies bacterianas pueden interactuar a través de quorum sensing. En algunas bacterias Gram positivo orales, se ha descrito el sistema de quorum sensing mediado por autoinductor-2, el cual es producido por la enzima LuxS. Éste ha demostrado tener un papel en el crecimiento, la formación de biopelículas y la resistencia a los ácidos en esos microorganismos. En B. dentium, existe poca información de este sistema. El objetivo de este estudio fue analizar la producción de autoinductor-2 por parte de B. dentium ATCC 27534 y los efectos de éste en la adhesión y formación de biopelículas.
Materiales y métodos: la presencia y actividad de AI-2 producido por B. dentium ATCC 27534 fue detectada mediante el sistema de ensayo reportero Vibrio harveyi ATCC BAA-1117, utilizando el sobrenadante de cultivos de B. dentium ATCC 27534 obtenidos en distintas etapas de crecimiento. El efecto de autoinductor-2 en la adhesión de B. dentium ATCC 27534 se analizó en microplacas de poliestireno de 96 pocillos en presencia o ausencia de DPD (autoinductor-2 sintetizado químicamente), utilizando saliva y medio de cultivo, a las 16 horas. La adherencia bacteriana se midió usando el ensayo MTT y un SynergyHT (Biotek®). Finalmente, el ensayo de formación de biopelículas y efecto del DPD se realizó sobre cubreobjetos de vidrio embebidos en saliva, durante 3 y 5 días, bajo las mismas condiciones que el ensayo de adherencia, y se documentó con un microscopio electrónico de barrido (JSM-IT300, JEOL).
Resultados: Se demostró la presencia de autoinductor-2 en el sobrenadante de cultivos de B. dentium ATCC 27534, indicando que este microorganismo es capaz de producirlo y secretarlo al medio externo. Se determinó, además, que este microorganismo es capaz de presentar adhesión a superficies sólidas, la que
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aumenta significativamente en presencia de autoinductor-2. Junto con esto, la presencia de autoinductor-2 exógeno incrementa la formación de biopelículas, mediante el aumento del número de células adheridas a la superficie, así como se pudo observar un aumento cualitativo de los niveles de exopolisacáridos excretados.
Conclusiones: Los resultados indican que el sistema de quorum sensing mediado por autoinductor-2 es importante para controlar los procesos fisiológicos de adhesión y formación de biopelículas en B. dentium ATCC 27534.
Investigaciones adicionales permitirán dilucidar cómo estos microorganismos se comunican entre sí a través de este sistema, así como su participación en la cascada de regulaciones que permiten la permanencia de B. dentium en los sitios de caries.
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Trabajo de investigación requisito para optar al título de Cirujano-Dentista
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Adscrito a Proyecto Fondecyt N° 11150928
Santiago - Chile
2018
Identifier
URI: https://repositorio.uchile.cl/handle/2250/187321
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