Caracterización proteómica del fluido gingival crevicular de sitios con sacos periodontales antes y durante la progresión clínica de la periodontitis

Abstract

La periodontitis es una enfermedad inflamatoria crónica, de alta prevalencia en la población chilena, causada por la disbiosis de la microbiota subgingival, que genera una respuesta inmune desregulada del hospedero, capaz de llevar a la destrucción progresiva de los tejidos de soporte periodontal. Actualmente no existe una comprensión clara de los eventos moleculares en el microambiente periodontal durante el proceso activo de progresión de la periodontitis, ni del proteoma del fluido gingival crevicular (FGC) asociado a este. El objetivo de este estudio fue caracterizar el proteoma del FGC humano asociado a la progresión clínica de la periodontitis. MATERIALES Y MÉTODOS: Se reclutaron 16 pacientes con periodontitis (≥5 dientes con profundidad de sondaje (PS) ≥5mm, perdida de nivel de inserción clínica (NIC) ≥3mm y sangrado al sondaje (SS) ≥20%), los cuales fueron evaluados semanalmente para determinar la progresión de la destrucción periodontal, obteniéndose en cada monitoreo muestras de FGC. Las muestras fueron categorizadas en dos grupos: Progresión (GP), sitios con pérdida nivel de NIC≥ 2mm desde el inicio del seguimiento; y Pre-Progresión (PP), conformado por las muestras de los mismos sitios obtenidas dos semanas previas al registro clínico de pérdida de inserción clínica. Cada grupo de estudio estuvo conformado por 25 muestras de FGC (n=25). Se realizó un procesamiento de las muestras de FGC para la elusión y cuantificación global de proteínas. Luego, las proteínas fueron identificadas con técnicas proteómicas de alto rendimiento de cromatografía líquida acopladas a espectrometrías de masas. Las proteínas identificadas fueron contrastadas en la base de datos SwissProt para su caracterización. El análisis “label free” determinó la abundancia relativa de proteínas y se establecieron las funciones biológicas y las interacciones proteína-proteína mediante las herramientas PANTHER GO y STRING. RESULTADOS: Se identificó un total de 1565 proteínas después del análisis (GP: 1547; PP: 1552). En GP se encontraron 13 proteínas exclusivas y 17 sobre expresadas, en cambio en PP se observó 18 proteínas exclusivas y 22 proteínas sobre expresadas. En GP se encontró un mayor porcentaje de proteínas de acción catalítica y de localización citosólica y una disminución de proteínas asociadas a respuesta inmune, biogénesis y organización celular. CONCLUSIONES: Existen diferencias cuantitativas en cuanto a la sobreexpresión y cualitativas en cuanto a proteínas exclusivas en el proteoma del FGC según el estado de progresión de la destrucción periodontal. La compresión del rol etiopatogénico de las proteínas identificadas puede conducir a nuevas alternativas diagnósticas y terapéuticas.