Evaluación in vitro del efecto citotóxico de itraconazol sobre células tumorales de cáncer de cabeza y cuello

Abstract

El cáncer es un conjunto de enfermedades en donde existe un crecimiento irregular de células anormales o con mutaciones. Estas se caracterizan por su capacidad de proliferar de manera descontrolada. Existen células que tienen la capacidad de llegar al torrente sanguíneo y migrar hacia diferentes órganos donde se quedan a residir, este proceso es conocido como metástasis. Entre los distintos tipos de cáncer se encuentran los cánceres de cabeza y cuello, los cuales son responsables de aproximadamente 500.000 nuevos diagnósticos cada año a nivel mundial. Un tipo de estas enfermedades de cabeza y cuello es el carcinoma oral de células escamosas, siendo uno de los más comunes. Este tipo de cáncer tiene una tasa de supervivencia a los 5 años relativamente baja del 50% o menos. En estudios recientes se identificó al Itraconazol como potencial fármaco antitumoral. Itraconazol es un agente antifúngico que ejerce sus efectos antimicóticos mediante la inhibición potente de la 14α- lanosterol desmetilasa, enzima que cataliza la conversión oxidativa de lanosterol a ergosterol. Se describe que Itraconazol podría ser un inhibidor de la vía de señalización hedgehog (Hh), y también que podría inhibir la vía de señalización mTOR que es un regulador crítico de la función en las células endoteliales y la angiogénesis. El blanco molecular de Itraconazol para este mecanismo sería el canal VDAC, que es un poro ubicado en la membrana externa mitocondrial. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto citotóxico, antiproliferativo y antimigratorio de Itraconazol en células tumorales de cabeza y cuello. Para esto evaluamos la potencia de Itraconazol sobre la viabilidad celular en células tumorales y no tumorales mediante la determinación de la concentración efectiva 50 (IC50) en células de carcinoma oral de células escamosas de lengua resistentes a cisplatino (CAL-27), células de carcinoma epidermoide de Laringe (HEp-2) y queratinocitos orales displásicos (DOK) a través de la técnica de MTT. También se determinó el efecto de Itraconazol sobre la migración celular en células CAL-27 mediante un ensayo de herida, y el efecto sobre la formación de colonias por medio de un ensayo clonogénico. 2 Se obtuvieron IC50 de 2,4 µM, 3,7 µM y 3,1 µM para Itraconazol en CAL-27 a las 24, 48 y 72 horas respectivamente, IC50 de 100 µM y 63,1 µM para Itraconazol en HEp-2 a las 48 y 72 horas respectivamente. Asimismo, se determinó que Itraconazol no tuvo efecto citotóxico sobre la línea celular DOK. Se observó además una disminución significativa en la migración de las células tumorales y en la capacidad de formar colonias en las células tratadas con Itraconazol. En conclusión, se observó un efecto significativo y selectivo de Itraconazol sobre la viabilidad celular de las líneas CAL-27 y HEp-2, además del efecto inhibitorio sobre la capacidad de migración y proliferación de las células CAL-27