| Abstract | dc.description.abstract | Introducción: La senescencia celular es una respuesta biológica al estrés durante
la cual las células cambian sus características fisiológicas, adquieren nuevas
propiedades y producen un fenotipo secretor asociado a senescencia (SASP). En
distintos tipos celulares, la senescencia induce la activación de p38 MAPK, así
como la disfunción en los compartimientos lisosomal y mitocondrial, lo cual no ha
sido evaluado en profundidad en la senescencia de los linfocitos T CD4+
. Por otro
lado, diversas enfermedades osteolíticas se caracterizan por presentar un
incremento en el número de linfocitos T CD4+
senescentes productores de un SASP
potencialmente pro-inflamatorio y osteoclastogénico en los tejidos afectados. Sin
embargo, en estas células no se ha detallado el SASP, ni tampoco se ha descrito su
presencia en la periodontitis. El objetivo de este estudio fue analizar el fenotipo de
los linfocitos T CD4+
senescentes, incluido el SASP, su capacidad
osteoclastogénica y su presencia en los tejidos periodontales de animales con
periodontitis experimental.
Métodos: La inducción de senescencia celular en linfocitos T CD4+
se realizó
mediante estrés oxidativo, usando H2O2. Los parámetros evaluados durante la
inducción de senescencia incluyeron viabilidad, activación, proliferación,
inhibición del ciclo celular, perfil secretor, tamaño celular y activación de p38
MAPK. La función lisosomal se analizó mediante la masa lisosomal, la actividad
de SA-β-Gal y la actividad de catepsina B, en cuanto que la función mitocondrial
se evaluó mediante la masa mitocondrial, el potencial de membrana mitocondrial,
y la producción de ROS mitocondriales y citoplasmáticas. El efecto de la
activación de p38 MAPK en los linfocitos T CD4+
senescentes sobre el
compartimiento mitocondrial y la producción del SASP se evaluó usando el
inhibidor especifico de p38 MAPK BIRB-796. Por otro lado, el efecto de los
linfocitos T CD4+ senescentes sobre la osteoclastogénesis se evaluó en monocitosmacrófagos derivados de la medula ósea mediante análisis de la actividad de la
fosfatasa ácida resistente a tartarato (TRAP). Finalmente, la identificación y
cuantificación de linfocitos T CD4+
con marcadores de senescencia se evaluó en
animales con periodontitis experimental inducida por ligadura.
Resultados: Los linfocitos T CD4+ expuestos a H2O2 evidenciaron características
de senescencia celular tales como inhibición de la proliferación celular, aumento
del tamaño celular, activación de p38 MAPK y alteración en la función lisosomal
y mitocondrial. Además, los linfocitos T CD4+ senescentes produjeron un SASP
enriquecido con mediadores del perfil Th17. En estas células, la inhibición de p38
MAPK atenúo la alteración mitocondrial y provocó una disminución moderada de
algunos mediadores moleculares del SASP. Por otro lado, el sobrenadante de los
linfocitos T CD4+ senescentes favoreció la diferenciación de osteoclastos TRAP+
.
Finalmente, se observó un aumento de linfocitos T CD4+ con marcadores de
senescencia celular en los tejidos periodontales de los animales con periodontitis
experimental inducida por ligadura.
Conclusión: Estos hallazgos proporcionan información preliminar sobre los
mecanismos subyacentes a la senescencia los linfocitos T CD4+ que incluyen
activación de p38 MAPK, disfunción lisosomal, alteración mitocondrial y la
producción de un SASP pro-inflamatorio con capacidad osteoclastogénica in vitro.
La presencia de linfocitos T CD4+ con marcadores de senescencia en el contexto
de la periodontitis sugieren su participación potencial en la patogenia de la
enfermedad. | es_ES |
