Expresión transcripcional de genes asociados a la formación de biopelículas duales de Candida albicans y Streptococcus sanguinis, expuestas a condiciones limitantes y exceso de azúcar

Abstract

Introducción: La cavidad oral alberga más de 700 especies microbianas que, al formar biopelículas, mantienen la homeostasis en condiciones de salud. Entre estos microorganismos destacan bacterias como Streptococcus spp. y hongos como Candida albicans. La caries dental es una enfermedad polimicrobiana, relacionada con un consumo elevado de azúcares fermentables que generan un microambiente ácido. C. albicans, comensal en la cavidad oral y que forma biopelículas con bacterias como Streptococcus sanguinis, puede convertirse en patobionte en condición de caries, sin embargo, la transición de la levadura de comensal a patobionte está poco descrito. Por lo tanto, se propone analizar el efecto del exceso y condiciones limitantes de azúcar en la expresión transcripcional de los genes asociados a virulencia, competencia y formación de biopelícula dual de ambos microorganismos bajo un modelo de caries in vitro. Metodología: Se utilizaron un aislado clínico oral de C. albicans y S. sanguinis (cepa SK36). Las biopelículas se desarrollaron sobre bloques de esmalte de bovino cubiertos con saliva estéril, las cuales fueron incubadas en condiciones microaerofílicas a 37°C, utilizando medio YNB y THB. Los bloques de esmalte/biopelículas se expusieron durante 5 días, 3 veces por día y durante 5 min a una solución de sacarosa al 10% y NaCl al 0,9%, las cuales corresponden a exceso y limitación de azúcar, simulando condiciones cariogénicas y control. Se extrajo ARN total para análisis transcripcional mediante RT-qPCR de los genes HWP1, SAP2 (C. albicans), y spxB, gtfP (S. sanguinis). Los datos se analizaron estadísticamente mediante T-test con GraphPad Prism 8.0. Resultados: Se observó una sobreexpresión significativa de HWP1 (p=0,03) y SAP2 (p=0,01) en C. albicans, así como de spxB (p=0,02) y gtfP (p=0,001) en S. sanguinis, en condiciones de exceso de azúcar en comparación a la condición limitante de azúcar. Conclusión: El exceso de azúcar influye notablemente en la expresión de genes asociados con la virulencia, competencia y formación de biopelículas en una biopelícula dual de C. albicans y S. sanguinis, indicando que ambos microorganismos adaptan dichas estrategias en respuesta a la condición de exceso de azúcar.