Infección por Aggregatibacter actinomycetemcomitans: Efecto sobre la integridad y permeabilidad de la Barrera Hematoencefálica e implicaciones en la enfermedad de Alzheimer

Abstract

Introducción: Diversos estudios han propuesto un vínculo entre periodontitis y la enfermedad de Alzheimer, lo que podría ser mediado por la inflamación sistémica y disfunción de la barrera hematoencefálica (BHE). Aggregatibacter actinomycetemcomitans, una bacteria asociada a periodontitis agresiva podría contribuir a procesos de neuroinflamación a través de sus vesículas de membrana externa y otros factores de virulencia. La BHE, estructura neurovascular altamente especializada, puede verse comprometida en su integridad frente a estímulos inflamatorios crónicos e infecciosos. Este trabajo busca demostrar si A. actinomycetemcomitans altera la integridad y permeabilidad de la BHE, utilizando un modelo in vitro de células endoteliales. Metodología: Se estableció un modelo in vitro de barrera hematoencefálica utilizando células endoteliales microvasculares primarias cultivadas en sistemas Transwell. Se evaluó la integridad de la monocapa mediante la resistencia eléctrica transendotelial (TEER). Se co-cultivó Aggregatibacter actinomycetemcomitans en uno de los compartimentos del Transwell y se recolectaron muestras a las 4, 8 y 24 horas en el otro compartimiento. Estas muestras se analizaron mediante PCR para cuantificación bacteriana, espectrofotometría de azul dextrano (2.000 kDa) para evaluar la permeabilidad, y se determinó la viabilidad bacteriana. Resultados: Se logró establecer una monocapa de células endoteliales viables y morfológicamente continua, confirmada mediante inmunofluorescencia y mediciones de resistencia eléctrica transendotelial. Al exponer esta monocapa a A. actinomycetemcomitans. agregada al compartimiento superior, no se observaron bacterias viables en el compartimiento inferior en el modelo in vitro. Además, no se detectó ADN bacteriano mediante PCR convencional en esta muestra. En el ensayo de permeabilidad con azul dextrano, se observó un aumento de concentración a lo largo del tiempo en la condición de co-cultivo bacteriano, aunque sin diferencias estadísticamente 2 significativas. Estos resultados sugieren una posible alteración de la barrera, aunque no fue posible establecer causalidad directa bajo las condiciones experimentales aplicadas. Conclusiones: Se logró establecer con éxito un modelo in vitro viable y morfológicamente continuo de la BHE utilizando células endoteliales microvasculares, lo cual fue confirmado mediante inmunofluorescencia y mediciones de TEER. Este modelo sirvió como plataforma robusta para la evaluación de la interacción con A. actinomycetemcomitans. Aunque los resultados no alcanzaron significación estadística para demostrar una alteración directa de la permeabilidad en las condiciones evaluadas, nuestros hallazgos justifican futuras investigaciones para explorar mecanismos más sutiles de disrupción de la BHE por A. actinomycetemcomitans y sus factores de virulencia, lo cual podría ser relevante en el contexto de la neuroinflamación asociada a periodontitis.