Efecto de especies asociadas a salud periodontal y asociadas a periodontitis sobre la invasión de células epiteliales gingivales por Fusobacterium Nucleatum

Abstract

La periodontitis es una enfermedad inflamatoria crónica e irreversible caracterizada por la destrucción de los tejidos de soporte dentario. Su desarrollo se asocia a una disbiosis en la biopelícula subgingival, donde el desequilibrio entre microorganismos patobiontes y comensales favorece respuestas inflamatorias perjudiciales. Esta disbiosis implica un aumento en la proporción de patobiontes sin reemplazo de los colonizadores primarios, junto con cambios en la composición global. Un grupo relevante dentro de esta microbiota corresponde a las especies del “core”, que mantienen proporciones similares en salud y en enfermedad. Comprender por qué especies del “core” como Fusobacterium nucleatum persisten en ambos estados y cómo contribuyen a la patogenicidad es un desafío clave. F. nucleatum establece interacciones tanto con colonizadores primarios como tardíos, y su actividad transcripcional cambia en salud y enfermedad. Interesantemente, si bien no es un patobionte clásico en la periodontitis, es capaz de invadir células epiteliales. Este estudio evaluó cómo se ve afectada su capacidad de invasión en células epiteliales orales cuando crece en comunidades microbianas asociadas a salud o a periodontitis. Se generaron dos comunidades a partir de inóculos congelados estandarizados: una comunidad asociada a salud periodontal (Actinomyces oris, Streptococcus gordonii y Corynebacterium matruchotii) y otra asociada a periodontitis (Porphyromonas endodontalis, Porphyromonas gingivalis y Filifactor alocis). Ambas se cultivaron en un medio basado en mucina y suero, monitoreando su crecimiento mediante recuento de UFC en medios selectivos y qPCR cuando fue necesario. Posteriormente, se obtuvo el medio condicionado de cada comunidad para cultivar F. nucleatum y evaluar su capacidad de invasión en la línea epitelial OKF6/TERT2. En este trabajo se obtuvieron inóculos viables y se estandarizaron condiciones de cultivo para ambas comunidades. Se establecieron protocolos semi-abiertos que aseguraron una adecuada representación de cada especie en fase exponencial tardía. A partir del día seis se obtuvo el sobrenadante y, en ese medio condicionado, se cultivó F. nucleatum para los ensayos de invasión. Si bien faltan experimentos para poder confirmar nuestros resultados, estos sugieren que la capacidad invasiva de F. nucleatum aumenta en el contexto de especies asociadas a periodontitis, comparado con salud.