Optimización y estandarización de un modelo in vitro de estimulación de células epiteliales orales con Streptococcus gordonii y Streptococcus sanguinis para el estudio de respuestas proinflamatorias

Abstract

Introducción: La periodontitis es una enfermedad inflamatoria crónica multifactorial asociada a biopelículas disbióticas que ocasionan la destrucción progresiva de los tejidos de soporte dental. Entre los colonizadores tempranos del microbioma oral destacan Streptococcus gordonii y Streptococcus sanguinis, los cuales contribuyen a la homeostasis oral, pero pueden comportarse como patobiontes en condiciones específicas. Estas especies son reconocidas por receptores tipo Toll (TLR) 2 y 4 en las células epiteliales, lo que induce la secreción de interleuquina-6 (IL-6), una citoquina clave en la progresión de la periodontitis. Se ha descrito que S. gordonii puede modular la producción de IL-6, mientras que S. sanguinis exhibe un efecto inmunomodulador más atenuado. En este estudio se evaluó el efecto de ambas especies sobre una línea celular epitelial oral humana (OKF6/TERT2), analizando la producción de IL-6 como marcador de respuesta proinflamatoria. Metodología: Se realizaron ensayos in vitro con células epiteliales humanas OKF6/TERT2 estimuladas con cepas de referencia de S. gordonii (ATCC 10558) y S. sanguinis (SK36). Las bacterias fueron cultivadas en medio BHI, inactivadas por calor/frío y aplicadas a una multiplicidad de infección (MOI = 100). Los sobrenadantes se recolectaron para cuantificar IL-6 mediante un ELISA comercial (Quantikine® Human IL-6), con lecturas a 450/562 nm. Los datos se analizaron en GraphPad Prism 10 y se informaron como media ± error estándar de la media (S.E.M). 9 Resultados: Las curvas de crecimiento de S. gordonii y S. sanguinis permitieron definir las fases exponenciales y estandarizar los inóculos bacterianos. El ELISA mostró concentraciones detectables de IL-6 en todas las condiciones, con un aumento basal en el control negativo, atribuible al uso de medio con suero fetal bovino. No se registraron incrementos significativos tras la estimulación, sugiriendo un comportamiento inmunomodulador de ambas especies. Conclusiones: El estudio estableció un modelo in vitro para evaluar respuestas proinflamatorias en células epiteliales orales frente a S. gordonii y S. sanguinis. Los resultados preliminares obtenidos sugieren que la secreción basal de IL-6, sin incrementos posteriores, sugiere una respuesta más reguladora que inflamatoria. Este modelo constituye una herramienta metodológica útil para futuras investigaciones que empleen medios libres de suero, bacterias viables o cocultivos con patobiontes periodontales.