Preparación de nanoemulsiones Pickering de aceite esencial de orégano y su evaluación como estrategia antibiopelícula contra de Candida albicans

Abstract

La candidiasis oral es la infección fúngica oral más común en el ser humano y se asocia principalmente a Candida albicans, levadura capaz de formar biopelículas con alta resistencia a antifúngicos convencionales. En búsqueda de nuevas estrategias farmacológicas, productos naturales como los aceites esenciales se plantean como alternativa. En este contexto, estudios previos han demostrado que el aceite esencial de orégano (AEO) posee actividad antifúngica y antibiopelícula; sin embargo, su principal desventaja es su rápida volatilización, perdiendo estabilidad en el tiempo. Una solución a este problema sería incorporarlo en nanoemulsiones pickering (NeP), las cuales permitirían controlar la liberación del aceite esencial en el tiempo. Metodología: Se utilizó la cepa C. albicans ATCC-90029. El AEO fue obtenido a través del método por arrastre de vapor de agua a partir de hojas de orégano. Las NeP fueron preparadas según Leong et al., 2015. Para evaluar actividad antifúngica se utilizó: Método de difusión de disco y método de difusión de pozo. Se determinó la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) por microdilución. La actividad antibiopelícula se determinó a través del ensayo de viabilidad por reducción de MTT y a través de ensayo de herida. La liberación de AEO a partir de NeP se midió utilizando prueba de liberación con membranas de diálisis. Los resultados se analizaron con el software Graphpad prism 6.0. Resultados: El halo de inhibición en el método de difusión de disco fue de 11 mm y 12,3 mm para el AEO y NeP respectivamente y de 17,7 mm para NeP en método de difusión de pozo. En células planctónicas la CIM fue de 0,02% para el AEO y 0,07% para la NeP. La IC50 en biopelículas fue de 0,03% y 0,09% para el AEO y la NeP, respectivamente. El área final con respecto a la herida inicial fue de 112% para AEO y de 111% para NeP. En prueba de liberación se obtuvo liberación controlada de AEO a partir de NeP durante el tiempo. Discusión: Las NeP, al ser estabilizadas con partículas sólidas, corresponderían a un medio para la liberación controlada de aceites esenciales. De acuerdo con nuestros resultados, la nanoemulsión evaluada permite mantener el efecto del aceite esencial tanto sobre células planctónicas como sobre biopelículas. Conclusión: La incorporación del aceite esencial de orégano a las nanoemulsiones mantuvo la actividad antifúngica y antibiopelícula del aceite sobre C. albicans en los ensayos realizados. Además, las NeP fueron capaces de liberar de manera gradual el aceite esencial.