Adaptación de la técnica de preparación de muestra de cráneo implantado con policaprolactona (PCL)

Abstract

Introducción: La policaprolactona es un polímero sintético recientemente utilizado en investigación en ingeniería tisular como un andamio para reconstrucciones de tejidos, gracias a sus distintas propiedades mecánicas y fisicoquímicas. Para determinar los efectos biológicos de PCL se requieren análisis morfológicos, se sabe que el procesamiento histológico convencional de muestras de tejidos implantados con PCL denota daños en la arquitectura de este. Esto se da por la exposición térmica y química de PCL, a parafina de un punto de fusión mayor o igual al de PCL en la etapa de inclusión, y a solventes agresivos como el xilol en la etapa de aclaramiento. Se propone una técnica adaptada para el procesamiento de muestras de tejidos implantadas con PCL, esta adaptación incluye la utilización de parafina de bajo punto de fusión (46 y 48 ºC) para la inclusión, y el uso de HistoClear® en lugar de xilol como agente aclarante, para, de esta manera, evitar la alteración del PCL y permitir su análisis morfológico. Metodología: Se usaron muestras provenientes de calota de ratón, a los que se les realizó un defecto óseo en el cráneo en donde fue implantado el PCL. Luego, se realizó la eutanasia de los animales, se retiraron las muestras de estos y se realizó el procesamiento histológico. Se dividieron las muestras en 2 grupos, el grupo control que fue sometido a la técnica de procesamiento histológico estándar, y el grupo experimental, en donde estaban las muestras que fueron procesadas con la técnica de procesamiento adaptada: inclusión en parafina de bajo punto de fusión (46 y 48 ºC) y uso de HistoClear® como agente aclarante. Resultados: Se observó que con la técnica adaptada se mantuvieron las características estructurales del implante y del tejido adyacente. En contraste, en el grupo control se observó una pérdida de integridad del implante, junto con alteraciones estructurales de este y del tejido adyacente. Conclusiones: La técnica adaptada de procesamiento histológico fue efectiva, evitando deformaciones y pérdida de integridad del implante y de los tejidos adyacentes, lo que demuestra su utilidad en investigaciones que involucren PCL, en ámbitos de regeneración ósea e ingeniería tisular.